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使用陶瓷膜进行酶液的澄清和浓缩

酶是一种重要的生物催化剂,其具有高效、专一、温和的特性。酶来源通常为微生物发酵液、动物组织提取液和植物组织提取液。提取液中酶含量通常较低,杂质较多,通常需要经过分离纯化,最终制备成纯度高、易转移存放的酶制剂产品,应用于如食品工业、制药工业、纺织工业、造纸工业等行业。

微生物发酵来源的酶制剂,通常是由细菌、酵母菌、丝状菌发酵、纯化得到。例如淀粉酶产生菌主要是枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌杆菌、曲霉菌和根霉菌;蛋白酶产生菌为地衣形芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌等细菌,链霉菌、曲霉菌、毛霉等丝状菌;葡萄糖异构酶来自链霉菌等。随合成生物学的发展,涌现出越来越多的特种酶,如医疗或清洗剂用蛋白酶,谷氨酸脱羧酶、天冬氨酸酶、天冬酰氨酶、青霉素酰化酶、β-半乳糖苷酶、α-乙酰乳酸脱羧酶、甘露聚糖酶等,其大部分来自基因工程改造后的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、毕赤酵母菌等。

酶的提取纯化工艺路线通常为:

菌体与酶的固液分离→酶液的浓缩脱盐→酶的纯化精制→酶的浓缩、冻干

固液分离常用:离心机、板框压滤机、陶瓷膜、中空纤维膜等。

酶液浓缩常用:卷式有机膜、中空纤维膜、陶瓷膜等。

酶的纯化精制:等电点沉降、盐析、离子交换树脂、凝胶色谱、亲和层析等。

酶的浓缩、干燥:陶瓷膜浓缩、有机膜浓缩,喷雾干燥或冷冻干燥等。

 

工业上,根据酶制剂不同的应用场景、制备不同纯度的产品,选择不同的工艺路线。

 

酶液的生产,涉及到的关键问题包括:

(1)酶液澄明度,浊度是否<5 NTU,菌体的是否完全去除

(2)酶纯度(酶的比活力)的提高

(3)酶收率,是否有过滤损失(澄清时的截留损失或浓缩时的透过损失)

(4)设备选型

(5)膜选型,膜的截留、过滤精度、除杂效果、污堵情况

 

采用陶瓷膜进行酶液澄清的优势:

  ● 过滤精度高,抗染污性强、易清洗;

  ● 耐酸、耐碱、耐氧化剂,耐高温等;

  ● 流道宽,纳污性好,可实现湿菌体浓度达到80%以上;

  ● 过滤过程无相变,酶活损失少,酶收率高;

  ● 自动化程度高;

  ● 无外源助剂添加,菌体浓缩液可直接使用;

  ● 过滤后酶液浊度远低于板框滤液;

  ● 膜设备清洗方便、可实现自动化,清洗后设备水通量可恢复初始状态。


陶瓷膜用于酶液澄清过滤的典型案例:

植酸酶发酵液的澄清;

蛋白酶发酵液的澄清;

转谷氨酰胺酶发酵液的澄清等;

陶瓷膜澄清工艺路线:

(1)酶发酵液→陶瓷膜过滤+洗滤→收滤液→超滤浓缩得酶浓缩液

(2)酶发酵液→板框过滤→框框滤液→陶瓷膜过滤+洗滤→收滤液→超滤浓缩得酶浓缩液

 

受酶的种类、分子量大小、结构、理化性质、来源、料液状态差异的影响,不同的酶透过陶瓷膜的情况各有差异。但陶瓷膜澄清过滤的核心问题还是保证酶活、降低透过液浊度、提高目标酶收率。在酶制剂的陶瓷膜澄清工艺开发和工程化放大过程中,通过筛选陶瓷膜材质和孔径、优化膜过滤参数、设备选型,已经逐渐解决上述问题。

 

此外,随着陶瓷膜超滤的开发应用,越来越多的酶制剂采用超滤陶瓷膜进行酶液的浓缩,并取得较好的效果,平均通量达到100L/㎡h,截留率达到99%以上,展现出越来越好的应用前景。

 

武汉博纳多年来致力于膜分离技术的应用工艺开发,将工艺、膜与设备相结合,积累了丰富的产品纯化经验和工程化放大经验,既解决工艺制造难题,又提高了产品质量,与客户共同提升行业技术水平。